血清血浆miRNA提取试剂盒
产品说明：
血清血浆 miRNA 提取试剂盒是目前提取小 RNA（<200nt）操作步骤最简单、重复性最好、小 RNA 产率最高的方法之一。使用该试剂盒通过一步上柱即可获得高纯度 miRNA，可在 10min 左右 完成小 RNA 的提取；且使用该试剂盒提取的小 RNA（Small RNA）中，长度在 15～200nt 范围的 RNA 在 95%以上，基本不含有大 RNA 和 DNA，可直接用于后续的反转录、Northern 杂交、测序 等应用。
产品组份：
Serum/Plasma miRNA Reagent
miRNA 吸附柱
RnaseFree TE Buffer
使用方法：
自备试剂：异丙醇、乙醇、75%异丙醇
1. 向 1.5mL EP 管中加入 600 µL Serum/Plasma miRNAReagent。将 500 µL 血清或血浆样本加入到 上述 600 µL miRNA Reagent A 中，漩涡 30 s 混合均匀。
2. 13000 rpm 离心 5 min，将上清约 1 mL 倒入到新的 2 mL EP 管中。加入 1 mL 异丙醇，上下颠倒 混合均匀。
3. 将上述溶液分三次倒入到吸附柱中（每次约 700µL），13000 rpm 离心 15s，倒掉过柱液。
4. 向吸附柱中加入 700 µL 75%异丙醇洗涤一次，13000 rpm 离心 15s，倒掉过滤液。
5. 向吸附柱中加入 500 µL 无水乙醇洗涤一次，13000 rpm 离心 15s，倒掉过滤液。
6. 吸附柱 13000 rpm 空离心 2min，去掉残留的乙醇。
7. 将吸附柱放入到新 1.5 mL EP 管中，室温放置 2 min，使残留乙醇挥发。在吸附柱滤芯上加入 30 µL Rnase Free TEBuffer，室温静置 2 min，13000 rpm 离 2 min，洗脱产物即为提取的 miRNA。
注：Serum/Plasma miRNA Reagent 溶液中含有胍盐，其具有强烈的腐蚀性，试验时请务必佩戴防护 眼镜、手套、口罩等防护措施，如有皮肤接触请立即用大量清水冲洗，再另行就医。
常见问题汇总：
1. 由于血清血浆中的 miRNA 含量极低，提取的 miRNA 浓度通常在 10ng/µL 以下，因此难以用常 规的 NanoDrop 测量浓度，建议直接使用 10 µL 进行下游反转录。由于本试剂盒提取的是小 RNA， 该浓度下的 miRNA Copy 数足以进行下游检测。
2. 由于血清血浆中 miRNA 的含量低，为了获得更可靠的实验数据，建议使用特异性和灵敏度更好 的 TaqMan 探针法进行 miRNA 的下游检测。本试剂盒提取的 miRNA 并不限于其它检测方法和 用途，包括 SYBR Green 法检测、二代测序、芯片等检测领域。
注意事项：
1. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普 通住宅区。
2. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
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